Medio de cultivo de Gamborg (B5)
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Medio de cultivo de Gamborg (B5): Fue formulado por Gamborg y colaboradores en 1968 para cultivo de tejidos vegetales, específicamente en el crecimiento de suspensiones celulares embriogénicas de raíz de soja, empleando ácido diclorofenoxiacético (2,4-D) como regulador del crecimiento. Contiene nitrato de potasio y sacarosa como la fuente de hidrato de carbono. Este medio ha sido ampliamente utilizado en el mundo para el cultivo de plantas in vitro de diferentes líneas celulares, callos y tejidos de especies como Taxus globosa, Splachnum ampullaceum, Eucalyptus camaldulensis, Dioscorea rotundata, Nicotina tabacum, Dacus carota, Musa spp, etc.
Composición química
| Macronutrientes | miligramos/litro |
|---|---|
| (NH4)2SO4 | 134 |
| KNO3 | 2500 |
| MgSO4 | 250 |
| CaCl2.aq | 150 |
| KH2PO4 | 0.15 |
| Micronutrientes | |
| KI | 0.75 |
| H3BO3 | 3.0 |
| MnSO4.H2O | 10.0 |
| ZnSO4.7H20 | 2.0 |
| Na2MoO4.2H2O | 0.25 |
| CuSO4.5H2O | 0.025 |
| CoCl2.6H2O | 0.025 |
| Na2.EDTA | 37.3 |
| FeSO4.7H2O | 27.8 |
| FeSO4.7H2O | 27.8 |
| Vitaminas | |
| Myo-inositol | 100 |
| Acido nicotínico | 1 |
| Piridoxina | 1 |
| Tiamina HCl | 10 |
| Hormonas | |
| Kinetina | 0,1 |
| 2,4-D | 0,1-10 |
La kinetina puede ser sustituida por otras citoquininas tal como 6-bencilamino purina (6-BAP). El 2,4-D también puede se puede sustituido por ácido naftalenacético (NAA) o ácido indolacético (AIA), en dependencia del propósito con el que se realizará el cultivo.
Los microelementos, vitaminas y hormonas se pueden preparar en una solución madre y ser añadidas antes de su uso.
Aplicación
En el Laboratorio de Biotecnología Vegetal del Instituto de Investigaciones de Viandas Tropicales (INIVIT) el medio de cultivo B5 ha sido empleado por autores como Rodríguez et al., 2014 para la inducción de callos con estructuras embriogénicas en el cultivar de ñame ‘Blanco de guinea’ (Dioscorea Poir.) obteniendo resultados satisfactorios.
Firmas comercializadoras
Existen varias firmas comercializadoras de este producto, catálogos como Plant Cell and Tissue Culture Phytopathology Biochemicals perteneciente a Duchefa ® y Technical Data de Plantigen Humedia, a través de las cuales se puede adquirir las formulaciones completas del medio B5.
Fuentes
- Gamborg O.L., Miller R.A., Ojima K. (1968): Nutrient requirement of suspensions cultures of soybean root cells. Exp. Cell Res. 50:151-158.
- Gautheret, R. J. La culture des tissues végétaux; téchniques et realisations. Masson, París. 863p.
- Plant Cell and Tissue Culture Phytopathology Biochemicals. DUCHEFA BIOECHEMIE B.V. Catalogue 2010-2012.
- Rodríguez D, López J, Montano N, Rayas A, Basail M, Beovides Y, Santos A, Medero V, Gutierrez Y. (2014): Formación de callos con estructuras embriogénicas en Dioscorea rotundata Poir cv. ‘Blanco de Guinea’. Biotecnología Vegetal. (14) 3: 185 – 188.
- http://yactivany.blogspot.mx/2012/03/tarea-1-medios-de-cultivos-definidos-e.html. Medios de cultivos y su aplicación en Biotecnología vegetal.
