Nanoparticulas de plata AgROVIT-CP

Nanoparticulas de plata (NPsAg) AgROVIT-CP Concepto: Producto patentado en Rusia y América. Las nanopartículas tienen formas esferoides, diámetros de 35±15 nm y con un contenido de plata metálica de 1,2%.

Nanoparticulas de plata (NPsAg) AgROVIT-CP. La preparación comercial de nanopartículas de plata AgROVIT-CP® (Novosibirsk, Rusia), es un producto patentado en Rusia y América. Las nanopartículas tienen formas esferoides, diámetros de 35±15 nm y con un contenido de plata metálica de 1,2%.

• Tipo de formulación: Líquido.
• Acción: Bactericida, Fungicida y viricida de amplio espectro
• Indicaciones: Nanopartículas (NPsAg) utilizado en el Cultivo de Tejidos Vegetales.
• Dosis recomendada: 50 mg L^-1 de NPsAg.
• Conservación: Almacenar a una temperatura de 8-10°C. No colocar en el congelador y proteger de la luz.
• Presentación: Envase de 15 mL.
• Intoxicaciones: No se han reportado casos.
• Solubilidad: En agua (preferentemente utilizar agua destilada estéril).

Uso en el cultivo de tejidos vegetales

Las Nanopartículas de plata (NPsAg) han demostrado ser efectivas en la inhibición de agentes contaminantes (hongos, bacterias y virus) sin generar resistencia. Las NPsAg en el Cultivo de Tejidos Vegetales (CTV) son empleadas de la siguiente forma:

1.-Desinfección de explantes. 2.-Esterilización de medios de cultivo. 3.-Inhibir efectos de etileno en algunas especies. 4.-Eliminación de virus in vitro.

AgROVIT-CP presenta efecto microbicida en explantes de caña de azúcar (Saccharum spp.) stevia (Stevia rebaudiana), vainilla (Vanilla Planifolia) y banano (Musa spp). Además, AgROVIT-CP ha sido empleado en la esterilización del medio de cultivo, para inhibir efectos de etileno y recientemente, en la eliminación de virus bajo condiciones in vitro. La utilización de AgROVIT-CP tiene las siguientes ventajas: reducción de los gastos de operación, disminución de pérdidas por contaminación y saneamiento de las vitroplantas.

Aplicaciones

AgROVIT-CP en la desinfección de explantes

AgROVIT-CP funciona como auxiliar en los métodos de desinfección durante el establecimiento in vitro de diferentes explantes. Se aplica al finalizar el protocolo de desinfección establecido previamente en el laboratorio. Las preparaciones de NPsAg se realizan en agua destilada estéril. Se recomienda una dosis estándar de 50 mg L^-1 durante 10 minutos. Esta concentración ha demostrado ser efectiva y no fitotóxica en explantes de stevia y vainilla. Para evaluar los efectos de las NPsAg sobre la desinfección de explantes, es importante evaluar el porcentaje de sobrevivencia y contaminación.

AgROVIT-CP como esterilizante para medios de cultivo de tejidos vegetales

Lavado de tapas y contenedores de medio de cultivo

Antes de iniciar la preparación del medio se deben tener limpios los recipientes de cultivo. Esta operación se realiza lavando frascos y tapas con abundante agua y detergente comercial. Después, los recipientes se enjuagan con agua común y posteriormente se trasladan hacia un área designada para este fin con ambiente limpio (de preferencia en campana de flujo laminar) y, por último, se enjugan con solución de hipoclorito de sodio al 0,05% en agua purificada o destilada para su uso inmediato.

Elaboración de los medios de cultivo

Para la elaboración de los medios de cultivo, se seguirán los protocolos normalmente utilizados en sus laboratorios hasta el ajuste del pH. Después de este punto, el medio de cultivo sólido o líquido se calienta en microondas o placa de calentamiento (se debe cubrir perfectamente el recipiente donde se prepare el medio para evitar derrames o contaminación). Es importante que todo el medio de cultivo hierva durante al menos 5 minutos. Para incorporar AgROVIT-CP, el medio de cultivo deberá tener una temperatura aproximada entre 75-80°C. Se recomienda dispersar el AgROVIT-CP en el medio de cultivo a la dosis que requiera y agitar manualmente (también puede utilizarse un magneto limpio durante todo el proceso de preparación del medio y no deberá retirarse hasta finalizar). Cuando se utilice medio líquido para biorreactores, AgROVIT-CP podrá agregarse al medio de cultivo antes o después de la siembra.

Dosificación de AgROVIT-CP

La dosificación de AgROVIT-CP se puede realizar directamente del frasco gotero o con apoyo de una micropipeta utilizando puntas estériles. Cuatro gotas de AgROVIT-CP equivalen a ~50 mg L^-1 de NPsAg. Se deberá tapar inmediatamente los recipientes después de la dosificación. Es importante mantener un máximo grado de asepsia.

Almacenamiento y utilización

Los recipientes de medio de cultivo deberán sellarse herméticamente con cinta plástica y almacenarse en el cuarto de medios de cultivo dentro del área destinada a dicho fin hasta su utilización. En caso de no contar con estas condiciones se almacena en un lugar fresco y limpio hasta el momento de ser utilizado.

AgROVIT-CP como inhibidor de etileno en el cultivo in vitro

El Etileno (C₂H₄) es un gas producido en algunas ocasiones por los tejidos vegetales in vitro. La producción de etileno está asociada con la recalcitrancia in vitro en algunas especies. El papel del etileno en el CTV no está completamente dilucidado. Sin embargo, es capaz de cambiar la capacidad morfogénica de explantes. En algunas especies el etileno in vitro promueve la producción y regeneración de callos embriogénicos. En otros estudios, este gas inhibe la regeneración y desarrollo de las plantas in vitro. La adición de cloruro de cobalto o nitrato de plata, pueden inhibir la síntesis o percepción de etileno, respectivamente. Estos compuestos han demostrado ser efectivos en la prevención de la recalcitrancia y promover la regeneración in vitro. En este sentido, sugerimos el uso de NPsAg para evitar los efectos de etileno durante el cultivo in vitro de especies sensibles a esta hormona. Para este estudio se recomienda agregar al medio de cultivo concentraciones de trabajo de 0, 12.5, 25, 50, 100 mg L^-1 de NPsAg.

Fuente

• Ficha Técnica AgROVIT-CP. www.colpos.mx/cordoba/index.htm